一、OD與吸光度的關(guān)系

吸光度和透光率在光譜學(xué)中是經(jīng)常使用到的兩個(gè)術(shù)語(yǔ)。

吸光度（Absorbance，簡(jiǎn)寫(xiě)Abs或A），常用A表示，是指光束通過(guò)被測(cè)樣品時(shí)，被測(cè)樣品對(duì)光的吸收量。

透光率（Transmittance，縮寫(xiě)Tra或T），常用T%表示，相對(duì)吸光度說(shuō)的，是指光束通過(guò)被測(cè)樣品時(shí)，有一部分光被樣品吸收，穿透過(guò)的光的強(qiáng)度（P）和入射光的強(qiáng)度（P0）比值就是透光率，那么T=P/P0。

有人可能要問(wèn)了，是不是A+P=P0，不是的，入射光中也有一部分因反射和散射而丟失的能量，那部分不在我們考慮范圍內(nèi)。

吸光度和透光率的關(guān)系用公式表示為：

其中，A是吸光度，T是透光率。

從公式中可以看出，吸光度和透光率是一一對(duì)應(yīng)關(guān)系，吸光度越高，那么透光率越低，反之，吸光度越低，透光率越高。

OD呢？

OD（optical density，縮寫(xiě)為OD），稱(chēng)光密度，此時(shí)也就是吸光度，在實(shí)際應(yīng)用中，因?yàn)槲�光度是物質(zhì)對(duì)光的吸收量，習(xí)慣性用吸光度表達(dá)。所以，此時(shí)OD就是上述公式中的A。

三、為什么是600nm，不是500nm和700nm？

OD600是指將分光光度計(jì)的波長(zhǎng)設(shè)定為600nm時(shí)，測(cè)定的光密度值，是微生物發(fā)酵過(guò)程中常用的生物量測(cè)定方法之一，可以間接反映發(fā)酵液菌體濃度。OD600越高，菌液中細(xì)胞數(shù)量越多，反之，細(xì)胞數(shù)量越少。

那么，為什么要將分光光度計(jì)的波長(zhǎng)設(shè)定為600nm來(lái)測(cè)定微生物發(fā)酵液中的OD值呢？

分光光度計(jì)在波長(zhǎng)600nm處對(duì)濁度的反應(yīng)比較靈敏，所以，一般用波長(zhǎng)600nm測(cè)定。

四、OD600可以測(cè)菌液濃度？

OD600正比于菌液濃度，OD值越高菌液濃度越高，OD值越低菌液濃度越低，他們成關(guān)系正相關(guān)，而不是線性關(guān)系。

在平常試驗(yàn)中，我們總想復(fù)雜問(wèn)題簡(jiǎn)單化，簡(jiǎn)單問(wèn)題更簡(jiǎn)單化，其實(shí)OD值和菌液濃度的關(guān)系一直也是比較關(guān)注的一個(gè)焦點(diǎn)，為什么呢？

因?yàn)闇y(cè)OD值只需要用分光光度法度數(shù)就行，最多稀釋個(gè)倍數(shù)，不用一分鐘肯定出結(jié)果，但菌液濃度可不一樣，菌液濃度是指一定體積內(nèi)某生物細(xì)胞或個(gè)體的數(shù)量，也就是活菌數(shù)（CFU/mL，菌落形成單位/mL），如何測(cè)定？

總之，沒(méi)一個(gè)簡(jiǎn)單的。相對(duì)來(lái)說(shuō)，血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)最簡(jiǎn)單，但也比測(cè)OD值麻煩。

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